Kuidas mõõta bakterite kasvu

Sisu

• etappidel
• 1. meetod Vaadake baktereid otse
• 2. meetod Biomassi mõõtmine
• 3. meetod Jätkatakse turbidimeetriliselt

Selles artiklis: Bakterite otsene vaatlusMõõtke biomassiToimige hägususe mõõtmise teel8 Viited

Bakterite kasvu saab mõõta mitmel viisil ja mõnda neist on keerulisem rakendada kui teisi. Tavaliselt kasutatakse kõige lihtsamaid ja need annavad suhteliselt täpsed tulemused, kui need on mõõtmise ajal ranged. Kõige tavalisemad tehnikad on bakterite vaatlemine ja loendamine, biomassi ja kuiva biomassi mõõtmine ning hägususe mõõtmine. Teie kooli laboris peaks olema vähemalt üheks neist meetoditest vajalik varustus.

etappidel

1. meetod Vaadake baktereid otse

1. 
   

   
   Valmistage seadmed ette. Lisaks sellele, mida tavaliselt leidub kõigis bioloogialaborites, vajate mõnda konkreetset eset. Veenduge, et kõik instrumendid ja konteinerid oleksid käepärast, nii et te ei pea kapis, kus varustust hoitakse, edasi-tagasi minema. Mõelge ette, mida teete, et teada, mida te igal etapil kasutate. Peate teadma ka mõnda peamist terminit.
   • Hankige hematsütomeeter. See on arvutuskambritega tera, mis on seotud mikroskoobiga. See on väga lihtne instrument, mida saab reguleerida ja kasutada. Leiate neid tarnijatelt, kes on spetsialiseerunud koolide ja teaduslaborite seadmetele. Tavaliselt pakutakse kasutusjuhendit.
   • Võtke petri tassi. See on väike ümmargune pinnapealne konteiner, kus saate jälgida baktereid.
   • Mõiste "kultuur" tähistab mikroorganismi, mida paljundatakse kunstliku osana teaduslikust eksperimendist.
   • Kultuuri puljong on kultuur, mille kaudu kultuur areneda.

2. 
   

   
   
   
   Kasutage Petri tassi. Pange bakterid kasti ja jälgige seda mikroskoobi all. Võite selle ka otse slaidile panna. Seejärel loendage bakterirakkude arv.

3. 
   

   
   Veenduge, et teil oleks õige kontsentratsioon. Kui baktereid on liiga palju, kattuvad nad üksteisega ja te ei saa neid õigesti loendada. Sel juhul lahjendage kultuur, segades seda väikese puljongiga. Kui neid on liiga vähe, pole tulemus märkimisväärne. Seejärel peate kontsentratsiooni suurendamiseks puljongit filtreerima.

4. 
   

   
   Loendage baktereid. Viimane samm on lihtsalt loota. Vaadake mikroskoobi all olevaid loenduskambreid ja pange tähele rakkude arvu. Võrrelge tulemust teiste sarnaste kogemustega.

2. meetod Biomassi mõõtmine

1. 
   

   
   
   
   Kontrollige, kas teil on vajalikud instrumendid. Selle meetodi rakendamine on aeglane ja hõlmab kallite seadmete kasutamist. Kui te ei pese seda, kasutage mõnda muud tehnikat. Teisest küljest, kui teie külastatavas laboris on sobivad tööriistad, on biomassi ja kuivmassi mõõtmine ideaalne, kuna see annab täpsed tulemused. Te vajate:
   • sundkonvektsiooni hüdrauliline ahi,
   • alumiiniumist kaal,
   • mitu Erlenmeyeri kolbi,
   • tsentrifuug või laboratoorne filtreerimissüsteem.

2. 
   

   
   Kontrollige, kas saak on Erlenmeyeri kolvis. Kui see pole nii, valage see sisse. Katse selles etapis on bakterid endiselt kultuuripuljongis. Need eraldatakse hiljem.

3. 
   

   
   Kuivatage kaal. Selleks pange see ahju. Võite kasutada ka 47 mm läbimõõduga tselluloosatsetaatmembraanifiltrit, mille poorid on 0,45 μm. Ükskõik, millist tööriista kasutatakse, mõõtke selle mass täpselt nii, et selle saaks tulemustest lahutada, kui saate saagi selle peale.

4. 
   

   
   Mix. Segage lerlenmeyerit nii, et kultuur oleks homogeenne. Tõepoolest, raskusjõu tõttu kipuvad rakud loomulikult langema konteineri põhja. Seega peate natuke raputama, sest need on ühtlaselt jaotatud ja teie proov on esinduslikum.

5. 
   

   
   Tsentrifuug. Tsentrifuugi abil eraldage bakterid kultuuripuljongist. Seda seadet kasutatakse konteineri ja vastukaalu pööramiseks väga suurel kiirusel. Puljong voolab, mis hoiab ainult elusaid aineid. Lisateavet leiate Internetist tsentrifuugi kasutamise kohta.

6. 
   

   
   Hankige tainas. Tilgutage see kaalukausile. Võite kultuuripuljongi visata, te ei vaja seda enam, kuid hoidke lerlenmeyeri kätt.

7. 
   

   
   Loputage tsentrifuug. Vala loputusvesi kaalukausile lisaks bakterirakkudele. Kõigi jaoks saadud tulemus annab teile biomassi.

8. 
   

   
   Leidke kuivmass. Proovi kuiva biomassi teadasaamiseks asetage kaalukauss 6–24 tunniks temperatuurile 100 ° C seatud ahju vastavalt oma seadmega kaasas olevatele juhistele. Bakterite põletamise vältimiseks ärge ületage seda temperatuuri. Seejärel kaaluge kõik, seejärel lahutage salve mass.

3. meetod Jätkatakse turbidimeetriliselt

1. 
   

   
   Valmistage oma varustus ette. Teil on vaja valgusallikat ja spektrofotomeetrit, seadet, mida leidub enamikus teaduslaborites. Vaadake kaasasolevat kasutusjuhendit, kuna igal mudelil on oma tööpõhimõte. See meetod on üks sagedamini kasutatavaid bakteri kasvu mõõtmiseks, kuna see nõuab ainult odavaid ja hõlpsasti kasutatavaid tööriistu.

2. 
   

   
   Tooge kultuurile valgust. Hägusust kasutatakse osakeste vedeliku sisalduse hindamiseks, selle abil saab kindlaks teha, kas see on enam-vähem hägune. Selle mõõtmise tulemus saadakse NTU (või nephelomeetrilise hägususe ühikutes). Proovi hägususe täpseks mõõtmiseks võib olla vajalik seadme kalibreerimine.

3. 
   

   
   Tehke märkmeid. Hägusus on bakterite hulk proovis. Spektrofotomeeter võimaldab teil teada saada ka lahuse läbilaskvust (% T), mille väärtus on pöördvõrdeline hägususega. Seejärel võrrelge bakterite kasvu mõõtmiseks erinevate proovide tulemusi.